By fanbingbing, 31 March, 2025
1.取材拍照并标注编号。 2.固定:将材料放入5ml离心管中,倒入FAA固定液浸泡小孢子,固定2一3天。 3.脱水:配50%、70%、80%、90%、95%的酒精(1/2二甲苯1/2酒精:150ml二甲苯,150ml酒精-配300ml;95酒精:332.5ml酒精 17.5ml水 -直接配350ml;;90酒精:180ml酒精,20ml水-其余配200ml;80酒精:160ml酒精,40ml水-200ml;70酒精:140ml酒精,60ml水;50酒精:100ml酒精,100ml水)。80% ,90% ,95 % ,100% ,100% 各15min浸泡,再使用1/2二甲苯1/2酒精,纯二甲苯,纯二甲苯各1h。 4.直接在有二甲苯的2ml离心管中加入石蜡,加满,烘箱烘 5.用镊子将小孢子放入新的离心管中 6.融蜡:水浴锅60度左右,将融蜡后的液体倒入2ml含植物的离心管,水浴锅1小时,换管 7.包埋:倒入提前融好的石蜡,将材料放于模具中 8.切片:安装刀片,固定植物材料,调整距离与高度,开始切片,用镊子和毛刷调整,切到后放于热水中,调整温度,载玻片贴上沾起来,放到盒中。烘箱烘1天左右 9.脱蜡复水:载玻片在纯二甲苯10min ,1/2二甲苯1/2酒精5min ,100% , 95% , 90%, 80% , 70% , 50% ,水各5 min 10.染色:番红为1%的水溶液,固绿为0.5 %的酒精溶液 番红染色4-6h,然后用水洗掉多余的番红溶液, 50% , 70% , 80% , 90%, 95%各10 min ,固绿10-40 s , 95% , 100%,1/2二甲苯1/2酒精,二甲苯各5min ,中性树胶封片,封片后用显微镜观察记录