连接转化： 1，10ul的体系：5×CEII Buffer 2ul,连接酶ExnaseII 1ul,回收片段4ul,线性克隆载体1ul,ddH2O 2ul,加完后37度30-40min. 2.10ul质粒＋33.3ulDH5，冰上轻混放30min，42度水浴90秒，立即冰上2-3分钟 3.加入无抗LB400ul摇50min 4.涂对应的抗性板37度，培养16h左右 转农杆： 1.先把感受态拿出来放冰上化 2.可以质粒里面加3ul的ddH2o,也可以不加 3，50ul感受态＋3ul质粒轻混，冰上5分钟，液氮5分钟，37度水浴5分钟，冰冷却5min，超净台400ul无抗LB，28度摇床2小时 4，涂K＋抗性LB板加200-300ul 5,28度培养箱2天 6，挑菌-菌检-制胶-看条带与基因长度是否相符 7，加甘油