1. 打开NCBI官网

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/

等待一会

结果会生成10对引物

检查引物质量：Tm值60℃左右，相差不要超过4，单条引物的self complementarity和self 3'complementarity单值不过5，和不过8。选择一对引物合成

原文链接：NCBI设计qPCR引物