1. 准备

42°水浴锅、超净工作台（200微升移液枪、黄枪头）

2. 连接

10微升体系

5X CE Buffer 2微升

线性化PC1300载体 2微升

PCR胶回收产物 5微升

Exnase Ⅱ酶 1微升

金属浴 37℃ 35分钟

3. 转化（DH5a）

3.1 取感受态细胞置于冰上融化，加入30微升感受态细胞，轻柔混合，冰上静置30min，42℃水浴90s，立即冰上放置3分钟

3.2 在超净台中加入200微升的没有抗性的LB，37℃摇床1h

3.3 涂板：吸取150微升菌液，涂板，吹干后封口膜封口，置于37℃培养箱培养12小时

原文链接：【金山文档 | WPS云文档】 目的基因连接载体转大肠杆菌
https://kdocs.cn/l/ccAPIfs73flh