背景 && 文献调查

从目前组装的染色体的结果来看，香榧不存在异形性染色体，旧有的结果应该是一个配对错误/统计错误。

但是已经做出来的图片总是造不了假的，所以他们的方法还是值得参考的，

陈可泳先生的文章是最早的，在1983年，应该是做了一次学术报告，网络上找不到文件，但是在另外的核型文章中看到了引用。

名字应该是口永

25年8月22日下午我在图书馆一位卢姓老师的帮助下找到了原始的摘要，原文如下：

标题：香榧的性染色体

用Giemsa分带方法，观察到香榧的11对染色体中，只有一对性染色体才显带。在雌性香榧植株中，一对性染色体是异形的，其中一条染色体的异染色质比另一条约多一半。而在雄性植株中。一对性染色体是同形的。这一雌性的差别，从间期核的染色体中心就明显可见。在雌性植株中。间期核的两个染色中心往往大小不等，其中一个比另外一个约大一倍，而在雄性植株中，间期核中的染色体中心大小是相同的。用Giemsa分带鉴别植物的雌雄还未见过有过的报道。

Giemsa 分带法（Giemsa banding, G-banding） 是一种用 Giemsa 染料 处理染色体的方法，用来产生特定的条带模式，帮助鉴定染色体、分析核型或发现染色体异常。
形成条带的分子基础：深色（G+ 带）区域，A-T 碱基富集，通常是 异染色质（heterochromatin），重组率低、基因密度低。这段区域更致密，转录活性更低，序列组成更特殊。

首先，在雌雄株中，11对染色体中只有一对染色体显带，说明这对染色体有特殊性，这一对染色体异染色质含量要显著高于其他10对染色体。
其次，尽管“雌树中，一对性染色体是异形的”。但是异染色质多了一半，不代表染色体本身一定多了一半。也就是说，这样一对染色体中，其中一条的异染色体质含量要显著高于另外一条。这样就说得通，也和我们基因组组装的结果不冲突。

但是，正常来讲每条染色体都应该或多或少显带的，这个实验的结果还是太奇怪了。至于核型实验的方法，他没提，我也不管。

在论文(1990)《香榧性别的早期鉴定》，处理方法是0.2%的秋水仙素或等量的0.2%秋水仙素和过饱和对二氯苯水溶液处理5-8小时，用水洗净后加固定液固定14h...........................

后面的不管，目前限速步骤是前面的预处理步骤。

在管启良（1993）论文《香榧的核型和性别的早期鉴别》中，明确是幼根在对二氯苯饱和水溶液中处理24小时。

这里的幼根都是指萌发种子或者萌发扦插苗的主根，和我现在取样的根比，形态上有没有差别呢？我不知道，理论上萌发种子的

云南红豆杉文章则是处理的茎尖，处理时间4h左右。

香榧的核型实验-姜晨昊

使用冰水混合物处理30h的材料时能看到染色体，但是染色体折叠严重，没有分散开

40x 物镜 下冰水混合物处理30h的材料

15小时对二氯苯处理的根尖，这个根尖已经很离散了，但是整个视野里分裂相太少了。

此外，我在做这个实验的时候我注意到，即使是在相同的处理条件下，有的根尖就是做不出来，找不到任何染色体，有的根尖能做出来，能找到染色体。所以在试验方法的时候，一组正常来讲至少有两个重复才行。

冰水混合物处理30h下 雌树扦插苗核型图，实际还要清晰一点，这是迄今为止最清楚的一张图。这个样是7月初雌树扦插苗刚生根的时候我取的样。

从目前的结果来看，我感觉到几件事情。

第一太细的根做不出来，从经验主义来看，要2mm左右的根才可用。

第二刚生根的扦插苗或实生苗可能是最好的材料。

第三乙酸处理不宜太久，现在感觉一次往乙酸放一个根，完成压片镜检之后再放另外一个比较合适。

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【金山文档 | WPS云文档】 核型实验总览
https://www.kdocs.cn/l/caixf0SixvVZ