1. 将液氮研磨成粉末的 100~200 mg 植物组织收集至 2 ml无 RNA 酶的离心管(自备)中。
2. 往离心管内加入1ml65°℃ 预热的 Buffer PPR1，用移液器吹打或涡旋30-60s，充分裂解细胞，以降低粘稠度及提高得量。
3. 将离心管于 65°℃水浴处理 5-10 min，期间颠倒混匀 1-2 次。
4. 将裂解物 12,000 rpm 离心5 min。
5. 吸取 900 ul上清至一个新离心管中,再加入 450 m无水乙醇,吹打混匀。此时可能出现沉淀，但不影响 RNA 的提取。
6. 将上述溶液转移至基因组 DNA 清除柱中，12,000rpm离心1min，弃滤液。注:请分批过柱，每次上柱体积不大于750ul。
7. 将基因组 DNA 清除柱置于一个 2m 无 RNA 酶的离心管(自备)内,往柱内加500ul Buffer PPR2，12,000rpm 离心1min，收集滤液(注RNA 在滤液中)，往滤液中加入 250 的无水乙醇，立即吹打混匀此时可能出现沉淀，但不影响 RNA 的提取。
8. 将上述溶液加入 HiPure RNA Column 中，12,000rpm离心1min,弃滤液。
9. 往柱内加入 700ulBuffer RWA,室温放置1min后12,000rpm 离心 30 s,弃滤液。
10. 往柱内加入 500 ml Buffer RwB(请先检査是否已加入无水乙醇!)10.12,000rpm离心 30s，弃滤液。重复洗涤一次，弃滤液。
11. 将 HiPure RNA Column 放回空收集管中，12,000rpm离心 1min，尽量除去漂洗液，以免柱中残存乙醇抑制下游酶促反应。

12.将 HiPure RNA Column 置于洁净的 1.5 ml 无 RNA 酶的离心管中，在膜中央加入 30 μ RNA Elution Buffer ，室温放置1~2 min,12,000 rpm室温离心1min，洗脱液即含RNA。

注：将 RNA Elution Buffer 加热至 65℃，可提高洗脱效率

【金山文档 | WPS云文档】 提RNA
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