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准备材料：白枪头，蓝枪头，1000ul的移液枪。20ul的移液枪，封口膜，2ml无菌无酶管，记号笔，LB 液体培养基（已灭菌）

操作（406大超净台内进行）

1：首先在2ml无菌无酶离心管中加入750ml的LB培养基。做好管号标记。

2：利取 20 μL 移液枪，戳取无菌白枪头，轻轻触碰并刮取平板上形态独立、边缘清晰的单菌落，避免触碰其他菌落或培养基空白区域。

3：再将沾有菌落的枪头直接浸入装有 LB 培养基的 2 mL 离心管中，轻轻吹打数次以确保菌落充分洗脱。将白枪头打入2ml中(枪头不取出)，用封口膜密封离心管盖与管身的缝隙，防止摇床培养时漏液或污染。

4：将密封好的离心管固定于恒温摇床，设置 37 ℃、200–220 rpm摇床，培养 12–16 小时（406,408俩个房间之间门的旁边）。

注意：

1：挑取菌落后的培养皿需在超净台内用封口膜密封，再移出至室温或 4 ℃ 保存，短期内（1–2 周）可再次用于挑取单克隆，避免杂菌污染。

2：挑菌的时候每次只挑单个菌放入离心管中，不可同时一管放置多个菌，否则会导致菌株遗传异质性，增加变异风险，影响后续实验结果。

3：所有耗材（枪头、离心管）均需无菌，避免交叉污染。

4：全程在超净台内进行，操作区域需经紫外线消毒 20–30 分钟。