By wangjiyang, 30 May, 2026
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用的是DNA胶回收与纯化试剂盒

其实整体最主要的就是加入液体,再离心,就是需要经历很多步。

详细操作流程

1:凝胶溶解与结合(关键控制点)

先取一个离心管,将切入的胶放入,再加入500ul的Buffer P(在众多瓶液体中呈黄色那瓶),再通过金属浴融化胶块。需要时澄清无杂质,流动丝滑。

2:DNA结合与初步离心

将混合液转移至核酸纯化柱中,盖紧管盖,12000 rpm离心30秒。

离心后,DNA被吸附于纯化柱的硅胶膜上,废液流入收集管

将纯化柱重新放回收集管中备用

3:第一次洗涤(去蛋白与色素)

向纯化柱膜中央加入700 μl Buffer WB,盖紧管盖,12000 rpm离心30秒。弃废液,重新将纯化柱放回收集管。(这个步骤的 Buffer WB必须预先加入无水乙醇,需要时混合过的,否则无法有效去除杂质。)

再重复操作一次,加700 μl Buffer WB,盖紧管盖,12000 rpm离心30秒。弃废液

4:高速空离(乙醇去除-最关键步骤)

12000 rpm离心2分钟,彻底去除膜表面和柱腔内残留的乙醇。

5:DNA洗脱

管位转换:

小心弃去2 ml收集管(避免触碰纯化柱膜),将纯化柱转移至一个洁净的1.5 ml离心管(此管用于收集最终产物,务必将标记做清楚。可能会保存很久来使用。)。

洗脱操作:

向纯化柱膜中央加入25-30μl Buffer TE,12000 rpm离心1分钟,DNA随液体流出至1.5 ml管底,此时可以将管底液体洗出重新打入纯化柱膜中央,再次12000 rpm离心1分钟,可提高小片段回收率