连接转化： 1，10ul的体系：5×CEII Buffer 2ul,连接酶ExnaseII 1ul,回收片段4ul,线性克隆载体1ul,ddH2O 2ul,加完后37度30-40min. 2.10ul质粒＋33.3ulDH5，冰上轻混放30min，42度水浴90秒，立即冰上2-3分钟 3.加入无抗LB400ul摇50min 4.涂对应的抗性板37度，培养16h左右 转农杆： 1.先把感受态拿出来放冰上化 2.可以质粒里面加3ul的ddH2o,也可以不加 3，50ul感受态＋3ul质粒轻混，冰上5分钟，液氮5分钟，37度水浴5分钟，冰冷却5min，超净台400ul无抗LB，28度摇床2小时 4，涂K＋抗性LB板加200-300ul 5,28度培养箱2天 6，挑菌-菌检-制胶-看条带与基因长度是否相符 7，加甘油

1.取材拍照并标注编号。 2.固定：将材料放入5ml离心管中，倒入FAA固定液浸泡小孢子，固定2一3天。 3.脱水：配50%、70%、80%、90%、95%的酒精（1/2二甲苯1/2酒精:150ml二甲苯，150ml酒精-配300ml；95酒精:332.5ml酒精 17.5ml水 -直接配350ml;；90酒精:180ml酒精，20ml水-其余配200ml；80酒精:160ml酒精，40ml水-200ml；70酒精:140ml酒精，60ml水；50酒精:100ml酒精，100ml水）。80% ，90% ，95 % ，100% ，100% 各15min浸泡，再使用1/2二甲苯1/2酒精，纯二甲苯，纯二甲苯各1h｡ 4.直接在有二甲苯的2ml离心管中加入石蜡，加满，烘箱烘 5.用镊子将小孢子放入新的离心管中 6.融蜡：水浴锅60度左右，将融蜡后的液体倒入2ml含植物的离心管，水浴锅1小时，换管 7.包埋：倒入提前融好的石蜡，将材料放于模具中 8.切片：安装刀片，固定植物材料，调整距离与高度，开始切片，用镊子和毛刷调整，切到后放于热水中，调整温度，载玻片贴上沾起来，放到盒中。